CASE.1

CRISPR-Cas9システム向け高純度gRNAの製造事例

住友化学では、鎖長95～131 merのgRNA製造に対応する標準製造法（SMM）を確立しています。 SMMを適用したgRNA製造では、ラボでの試製造を一度実施するだけで、GMP製造への直接スケールアップが可能となります。 これにより、お客様は開発スケジュールの短縮とコスト削減の二重の利点を享受できます。 本事例では、新たに稼働した大分工場のgRNA製造プラントにて初のGMP製造を行い、純度85%以上の高品質なgRNAの製造に成功したことをお知らせいたします。

SMM開発の背景

ラボスケールからGMP製造へのスケールアップは、通常時間を要するプロセスです。
特にGMP製造前に行うパイロットバッチは、コストと納期に大きな影響をぼ及ぼし、開発スケジュール遅延の要因となり得ました。

この課題を解決するため、当社はSMMを開発し、ラボからGMP製造への移行においてパイロットバッチを省略することを可能にしました。

遺伝子治療用ゲノム編集医薬品の開発においては、お客様のgRNA配列の決定から臨床試験まで最短での進行が求められます。 そのため、配列決定からGMP製造までのタイムラインは、迅速に進められることが重要視されます。

SMM適用製造の成果

CRISPR-Cas9システム用gRNAのGMP製造にて、製品純度86.5%を達成。

お客様の配列開示からGMP製造完了までを、わずか6ヶ月で実現。

当社は、GMP製造された長鎖gRNAを迅速にお客様へ供給することができます。お客様のご要望や開発スケジュールについて、当社へお気軽にお問い合わせください。

CASE.2

鎖長130 mer、純度80%以上の高純度gRNAの製造事例

住友化学は、業界をリードする高純度のgRNA製造技術を有しています。CRISPR-Cas9システムで一般的に用いられる鎖長約100 merのgRNAに加え、最近のゲノム編集技術の進歩により、より長鎖で化学修飾が施されたgRNAの需要が高まっています。 当社では、独自のgRNA製造及び分析技術により、GMP下で鎖長130 merのgRNAを製造し、純度80%以上の製品をお客様に提供しました。

鎖長130 mer gRNA製造の課題

gRNAの製造では、以下のプロセスを繰り返します。

脱トリチル化

カップリング

酸化

キャッピング

その後、合成されたgRNAを固相担体から切り出し、脱保護、精製、脱塩、単離して製品化します。例えば、鎖長130 merのgRNA合成では、合計 520反応（130サイクル×4反応）が必要であり、この多くの反応に伴う収率及び純度の低下が、長鎖gRNAを合成する際の大きな課題でした。

鎖長130 mer gRNA製造の成果

お約束のスケジュールから一日の遅れもなく、GMP製造を完了。

当社の標準製造法（SMM）の適用により、ラボで試製造を一度実施しただけで、パイロットバッチを経ることなくGMP製造への直接スケールアップを実現。

製品純度：82.5%を達成。

当社は、鎖長130 merといった長鎖gRNAのGMP製造で、このような高純度を達成した世界初のサプライヤーであると自負しています。遺伝子治療用gRNAの品質において、純度は重要な要素です。当社は、独自開発した製造・分析技術により、ゲノム編集治療の普及と技術応用に貢献し、より長鎖のgRNAをより高純度で製造する技術力の向上に努めてまいります。

CASE.3

鎖長155 mer、純度81%のgRNAラボサンプル合成

住友化学は、遺伝子編集医薬品の研究開発を支援するため、高純度の長鎖gRNAを提供しています。 特に、高純度の長鎖gRNAサンプルが必要な際には、ぜひ当社へご相談ください。 当社は、将来のGMP製造に向けたお客様の開発計画に対し、きめ細やかな対応でお客様のニーズに応えてまいります。

ラボサンプル合成依頼の背景

お客様より、高純度の鎖長155 mer gRNAサンプルの合成依頼がありました。既に他社では対応が難しいとお断りされていた状況でしたが、当社であれば、他社での実現が難しい複雑な修飾を持つ長鎖配列についても、高純度のラボサンプルを供給することができます。

当社のラボサンプルは、通常、お客様の配列開示から約2ヶ月で納品可能です。秘密保持契約の締結後に、配列情報をいただけましたら、数量、価格、タイムラインについてお知らせいたします。

ラボサンプル合成の成果

配列開示後2ヶ月以内にサンプルを納品

製品純度：81%を達成

製品得量：オリゴヌクレオチドとして約10 mg

当社が合成したgRNAラボサンプルの品質は、お客様にご評価いただくことでその違いを実感していただけると自負しております。当社のgRNAは、各国規制当局の要求に応えることができる卓越した品質を誇ります。当社は、お客様の開発スケジュールに沿って、ラボサンプルからGMP製造への移行を円滑にサポートいたします。

詳細やご注文については、当社へお気軽にお問い合わせください。

CASE.4

鎖長200 mer gRNAの高純度合成

住友化学は、世界トップクラスの純度を誇る長鎖gRNAの製造・供給において、さらなる技術革新を遂げ、鎖長200 mer gRNAの高純度合成に世界で初めて成功しました。 この成果は、急速に発展を遂げるゲノム編集技術への貢献に向けた当社の継続的な取り組みを象徴しています。 一般に、gRNAの合成ではサイクル収率が0.1%異なるだけで、総収量に大きな影響を与えます。 鎖長が200 merに及ぶと、その影響はさらに顕著になります。

長鎖gRNA合成のための要件

gRNAの合成において、サイクル収率を向上させるためには以下の3 要素が不可欠です。今回、鎖長200 mer gRNAの合成にあたり、当社はこれら全ての開発に成功しました。

高品質なアミダイト

高品質な固相担体

適切な分析法

鎖長200 mer gRNA合成の成果

HPLC純度：74%を達成

200 mer前後の1 mer差の分析識別を実現

本合成の結果は、当社で開発したPMMアミダイト及び固相担体の性能が優れていることを示しています。 当社は、鎖長200 mer gRNAを効率的に合成するために、長鎖gRNAの固相担体として従来用いられているCPG担体の欠点を改良した新たなZEO担体を開発し、200 mer gRNAの高純度合成を実現しました。

また、本合成の成功を確認するためには、鎖長200 merのgRNAを適切に分析できる分析法が必要となります。 従来の当社HPLC分析法では、5’末端を切断した不純物と200 mer gRNAとの混合物の分析において、199 merと200 merとのピークを明確に分離できないことが確認されました。

この問題を解決するため、当社HPLC分析法を200 mer gRNA分析用に最適化検討し、200 merからN-1不純物ピークを先端分離することに成功しました。続いて、本合成の成功を証明するために、5’末端が1 merずつ異なる196 merから200 merまでの各gRNAを合成し、それらの混合物を分析することにより、本分析法の適合性を確認しました。以下のクロマトグラムから、本分析法は、196 merから200 merの範囲内で1 mer の違いをそれぞれピーク先端分離できることを示しています。

将来、次世代の基盤技術として、現在一般的に用いられているgRNAよりもさらに長鎖のgRNAが必要とされる可能性があります。今後、当社は、本実験結果をGMP製造用の実機設備でも良好に再現できるよう、検証を重ねる予定です。当社は、先端技術の開発を通じてゲノム編集治療の可能性のさらなる向上に貢献していきます。